Inhoud
De voor- en nadelen van de lichtmicroscoop hebben betrekking op licht, vergroting en resolutie. Microscopen van licht vergroten zichtbaar licht - een duidelijk voordeel, want dit is wat onze ogen kunnen zien. De vergroting (hoe groot een object wordt weergegeven) en de resolutie (duidelijkheid van details) zijn echter beperkt bij gebruik van lichtmicroscopen.
Lichtbron
Lichtmicroscopen gebruiken ofwel een reflecterende spiegel of een elektrisch licht voor directe verlichting door het monster en in het lenssysteem. Spiegelsystemen zijn minder duur, maar vereisen voldoende verlichting van de omgeving en meer geduld om aan te passen. Elektrische lichtsystemen zijn duurder en vereisen een stopcontact in de buurt, maar zijn eenvoudiger te gebruiken.
Intensiteit van licht
Intensiteit van licht (helderheid) is belangrijk als het licht door het monster dat u ziet passeert. Fijn, doorzichtig (licht) monster wordt het best bekeken met licht met een lage intensiteit, terwijl dikkere, ondoorzichtige monsters een hoger intensiteitslicht vereisen. Een nadeel van lichtmicroscopie is dat sommige monsters te dik of ondoorzichtig zijn om door een dergelijke microscoop te worden gezien. Zeer dunne of doorzichtige monsters kunnen worden gekleurd om het contrast te vergroten voor een betere weergave. Dit proces zal echter levende exemplaren doden.
Aanpassen van de lichtintensiteit
Het diafragma, dat zich boven de lichtbron en onder de glasplaat (monsterplatform) bevindt, past de hoeveelheid licht die door het monster gaat aan. Er zijn twee soorten diafragma's beschikbaar: een vaste diafragmaselector en een instelbare diafragma-camerastijl.
Het samenstel met vaste opening bestaat uit verschillende verschillende openingsgroottes op een roterende plaat. Het gewenste diafragma wordt geselecteerd door aan de knop te draaien. Diafragma's met vaste diafragma's zijn minder duur, maar bieden een minder nauwkeurige regeling van de lichtintensiteit.
Het instelbare diafragma met diafragma biedt een continu variabele lensopening en de f-stop op een cameralens en biedt dus een preciezere controle over de intensiteit van het licht. Deze systemen zijn duurder.
uitbreiding
Groter is niet altijd beter. Lichtmicroscopen kunnen objecten tot 1000x (duizend keer groter dan het leven) zeer goed vergroten. Daarnaast wordt het beeld steeds meer vervormd en wazig. Het vergroten van de grootte maakt geen beter beeld en maakt het beeld zelfs onbruikbaar.
Met behulp van een vergroting tot 1000x kunnen alle soorten levende organismen worden waargenomen, tot in de kleinste bacteriecellen. Dit maakt lichtmicroscopie een krachtig hulpmiddel voor het bestuderen van celtypen, vijverwater, bodemmonsters en andere studies, waar een overzicht van micro-organismen gewenst is. Lichtmicroscopie is echter nauwelijks bruikbaar voor de studie van subcellulaire structuren, vanwege de resolutielimieten die inherent zijn aan het gebruik van licht.
resolutie
Resolutie is een maatstaf voor de duidelijkheid van goede details die in een afbeelding worden geproduceerd. Afbeeldingen met een lage resolutie lijken wazig of "wazig". Afbeeldingen met een hoge resolutie zijn helder, duidelijk en gedetailleerd. Het grootste nadeel van lichtmicroscopen is de resolutiegrens. Naast de 1000x vergroting verliezen lichtmicroscopen al snel het vermogen om kleine details fijn af te stellen. Dit is het resultaat van de fysieke eigenschappen van licht, niet van de kwaliteit van het instrument. Voor een betere resolutie van details van subcellulaire structuren, moeten andere technologieën zoals elektronenmicroscopen worden gebruikt.