Inhoud
Chromatografie is een methode om stoffen te scheiden. Het wordt uitgevoerd met behulp van een smalle buis (kolom) gevuld met een specifiek materiaal. Een mengsel van verbindingen wordt onder druk door de kolom geperst. Elke verbinding verlaat de kolom gedurende bepaalde intervallen en vertegenwoordigt grafisch een piek in een chromatogram. De positie van de maximale piek, genaamd retentietijd, is specifiek voor elke verbinding. De prestatie van de chromatografische kolommen wordt uitgedrukt in een aantal theoretische platen. Een theoretische plaat is een denkbeeldige laag in een kolom die helpt om het scheidingsproces te interpreteren. Een groter aantal theoretische schotels komt overeen met een betere efficiëntie van de kolom.
Stap 1
Haal een grafiek van een chromatogram uit je chromatografische kolom.
Stap 2
Trek een verticale lijn van de maximale piek naar de basislijn.
Stap 3
Meet de lengte van die lijn en deel deze door 2 om het midden te vinden. Noteer in deze stappen alle metingen in millimeters (mm).
Stap 4
Trek een lijn die het midden van de lijn kruist, evenwijdig aan de horizontale as.
Stap 5
Meet de lengte van de lijn in stap 4 om de piekbreedte op halve hoogte te verkrijgen. De piekbreedte is bijvoorbeeld 12 mm.
Stap 6
Meet de afstand van 0 tot de maximale piek om de retentietijd te verkrijgen. De verblijftijd is bijvoorbeeld 650 mm. Merk op dat de retentietijd meestal in minuten wordt uitgedrukt, maar ook evenredig is met de gemeten lengte.
Stap 7
Verdeel de retentietijd door de breedte van de piek en maak de coëfficiënt vierkant. Vermenigvuldig vervolgens het resultaat met 5,55 om het aantal theoretische platen te berekenen:
Aantal theoretische platen = 5,55 * (retentietijd / piekbreedte) ^ 2
In ons voorbeeld zou het 5,55 * (650 mm / 12 mm) ^ 2 = 16.284 theoretische platen zijn. Het resultaat wordt afgerond op het dichtstbijzijnde gehele getal.