Inhoud
Seriële verdunningen worden voornamelijk gebruikt in chemische en biologische laboratoria om experimenten uit te voeren. Ze worden meestal weergegeven op logaritmische schalen of in veelvouden van 10. Meestal worden bacteriën, cellen en opgeloste stoffen verdund om als controllers in de experimenten te fungeren. Verdunningen zorgen nog steeds voor een hoge mate van nauwkeurigheid bij dosis-respons-experimenten, waarbij alle monsters uit dezelfde batch zijn afgeleid. Bovendien kunnen ze nodig zijn om het aantal deeltjes in een monster te verminderen voor gebruik in geautomatiseerde apparatuur. Seriële verdunningen worden voltooid door een klein volume van het oorspronkelijke monster te nemen, het in een nieuwe fles te gieten en het met de verdunde oplossing terug te brengen naar het oorspronkelijke volume. De algemene formule is: beginconcentratie / verdunningsfactor = nieuwe concentratie. In het onderstaande voorbeeld berekenen we een seriële verdunning van 10 ml van 2,5 x 10 ^ 7 cellen / ml tot 25 cellen / ml met een verdunningsfactor van 100.
Stap 1
Draag een veiligheidsbril en handschoenen voordat u met stoffen werkt.
Stap 2
Label de drie reageerbuizen met het kleurpotlood als volgt: 2,5 x 10 ^ 5, 2,5 x 10 ^ 3, 25 cellen / ml.
Stap 3
Gebruik de formule (oorspronkelijke celconcentratie / verdunningsfactor = nieuwe concentratie) om de eerste verdunning op te lossen. De oorspronkelijke concentratie is 2,5 x 10 ^ 7, de verdunningsfactor 100 en het resultaat van de nieuwe concentratie van deze stap is 2,5 x 10 ^ 5 cellen / ml.
Stap 4
Verdun het originele monster tot 2,5 x 10 ^ 7 cellen / ml met een factor 100. Verwijder 1 ml van de oorspronkelijke oplossing met de bijbehorende pipet en giet het in de buis met het label "2,5 x 10 ^ 5 cellen / ml". Giet met de andere pipet nog eens 99 ml water in de buis om de gewenste verdunning te voltooien.
Stap 5
Verdun de cellen opnieuw met een factor 100. Verwijder op dezelfde manier als hiervoor, maar nu met 1 ml van de 2,5 x 10 ^ 5 cellen / ml buis in de buis met het label "2,5 x 10 ^ 3 cellen / ml. ". Voeg 99 ml water weer toe aan deze nieuwe buis om de verdunning te voltooien, wat resulteert in 2,5 x 10 ^ 3 cellen / ml.
Stap 6
Verdun de cellen nu voor de laatste keer. Herhaal dezelfde procedure als voor het gieten in de buis met het label "25 cellen / ml". Voeg 99 ml water toe om het proces te voltooien en de gewenste verdunning van 25 cellen / ml te bereiken.