Inhoud
Chromatografie wordt veel gebruikt in chemische laboratoria om de identiteit van een onbekende component te bepalen. Deze component stroomt door het wikkelmateriaal van de kolom en reageert met de deeltjes. De interacties tussen de deeltjes en de componenten in het monster zijn gebaseerd op de aantrekkingskracht of oplosbaarheid daartussen. Moleculen die geen interactie hebben met de deeltjes van het omhulselmateriaal mogen er ongehinderd doorheen. De tijd die de moleculen nodig hebben om van het injectiepunt naar het systeem te gaan op de maximale piek van een niet-reactief molecuul, is de dode tijd van de kolom.
Stap 1
Versterk het onbekende monster met een kleine hoeveelheid van een verbinding die niet wordt vastgehouden door het kolommateriaal. De compound zal door de kolom gaan zonder interactie met het verpakkingsmateriaal in de kolom.
Stap 2
Laad de injectiespuit met ongeveer 20 microliter van het monster en steek de injectienaald in de injectiepoort. Laad de monsterlus vanaf de klep door de spuit in de klep te legen.
Stap 3
Schakel het chromatografie-instrument in en start de mobiele fase. Deze fase stroomt door het instrument en neemt het monster door de kolom en de detector die in een afvalbak terechtkomt.
Stap 4
Activeer de klep, waardoor het monster het vloeistofstroompad kan binnendringen. Dit laadt de monstercomponenten naar de bovenkant van de kolom en de scheiding begint.
Stap 5
Bewaak het emittersignaal van de detector en identificeer de eerste piek in de chromatograaf. Het verschil tussen de injectietijd en het maximum van de eerste piek, vertegenwoordigd door de wapeningscomponent, is de dode tijd.
Stap 6
Meet de afstand tussen het injectiepunt en de maximale hoogte van de eerste piek. Vermenigvuldig de afstand met de snelheid van het papier of de as om de dode tijd te vinden.