Inhoud
UFC staat voor Colony Forming Units, een term die in de microbiologie wordt gebruikt om het aantal bacteriën in een oplossing te kwantificeren. Afhankelijk van de concentratie van het monster, zal het nodig zijn om meerdere verdunningen uit te voeren en de monsters in petrischalen te plaatsen. Als er veel bacteriekolonies zijn, zal het tellen moeilijk zijn, en als er weinig zijn, is het monster mogelijk niet representatief. Het is over het algemeen een goed idee om monsters van de oorspronkelijke oplossing op de platen te plaatsen, één 1/10 verdunning (1 deel oplossing en 9 delen zoutoplossing), één 1/100 verdunning en één 1/1000 verdunning.
Bereken CFU uit bacteriële verdunningen
Stap 1
Voer een voorlopige telling van elke plaat uit na de incubatietijd van de bacteriën, meestal een dag of twee. Je zou alleen individuele kolonies moeten tellen, dit zouden aparte geïsoleerde punten moeten zijn, geen sets van kolonies die samen groeiden. Kies de plaat met meer dan 30 en minder dan 300 kolonies.
Stap 2
Tel het aantal individuele kolonies. Dit is het UFC-nummer van uw verdunning - u moet een eenvoudige berekening uitvoeren om de UFC uit uw oorspronkelijke steekproef te bepalen. Voor dit voorbeeld wordt een hypothetische plaat met 46 kolonies gebruikt.
Stap 3
Bepaal de grootte van de verdunning die u heeft gebruikt. Idealiter zou je de petrischalen aan het begin van het experiment moeten labelen. Voor dit voorbeeld heeft u mogelijk 1 ml van de bacteriecultuur gemengd met 99 ml zoutoplossing. Dit vormt een verdunning van 1/100.
Stap 4
Vermenigvuldig de verdunningsgraad met de hoeveelheid die u op het bord legt. Als je in dit voorbeeld 0,1 ml van je 1/100 verdunning op de agar doet, moet je 0,1 x 1/100 vermenigvuldigen voor een resultaat van 1/1000 of 0,001.
Stap 5
Deel het UFC-nummer van de verdunning (aantal kolonies dat je hebt geteld) door het resultaat dat je hebt verkregen in stap 4. Voor dit voorbeeld zou je 46 delen door 1/1000, wat hetzelfde is als vermenigvuldigen met 1000. Het resultaat is 46000 UFC in de origineel monster.