Inhoud
HPLC (high performance liquid chromatography) en CG (gaschromatografie) zijn wetenschappelijke methoden die worden gebruikt om monsters te analyseren om te bepalen wat het monster bevat of de concentratie van moleculen erin. Beiden gebruiken hetzelfde principe, namelijk dat de zwaardere moleculen langzamer zullen elueren of stromen dan de lichtere (polariteit speelt ook een rol in de elutietijd). Hoewel het idee hetzelfde is, hebben de methoden verschillende verschillen.
De mobiele fase
De mobiele fase van de chromatografische apparatuur is de stof die het monster door de machine beweegt. Bij CLAE is de mobiele fase een vloeistof gemaakt van een organisch oplosmiddel, ultrapuur water en andere ingrediënten om compatibiliteit met het monster te garanderen. CG gebruikt in deze fase een gas; de meest gebruikte zijn helium, stikstof, argon of waterstof, afhankelijk van wat er wordt geanalyseerd.
De kolommen
Terwijl het monster wordt getransporteerd door de chromatografische kolommen, werken het en de mobiele fase samen met de inhoud van de kolom, waardoor de monstercomponenten op verschillende tijdstippen elueren. CLAE-kolommen zijn meestal buizen van 10 tot 15 cm, gemaakt van metaal of glas, stevig verpakt met siliconen- of koolstofkettingen van verschillende lengtes. CG-systemen hebben capillaire kolommen gewikkeld rond binnenwanden bekleed met verschillende materialen, afhankelijk van de laboratoriumbehoeften. Uitgerekt kunnen CG-kolommen tot 30 m meten.
De voorbeelden
CG-chromatografie wordt gebruikt voor vluchtige verbindingen (die snel afbreken), terwijl HPLC beter is voor minder vluchtige monsters. Als een monster zouten bevat of een lading draagt, moet het worden geanalyseerd met de HPLC en niet met de CG.
Temperatuurregeling
De CG-kolommen worden in een oven in de machine opgeslagen. Een computer verandert de temperatuur terwijl de monsters worden geanalyseerd. Hoe hoger de temperatuur, hoe sneller het monster elueert, maar de hogere temperaturen geven slechte resultaten. CLAE-kolommen worden te allen tijde op een stabiele temperatuur (vaak kamertemperatuur) gehouden.